REK08-01 重组肠激酶底物 

重组肠激酶底物 

货号：REK08-01

1. 产品特性

2. 使用方法

底物经EK酶切后，可形成两个片段，通过SDS-PAGE检测分析酶切结果

1. 测活缓冲液

25 mmol/L Tris-HCl pH8.0：称取0.3031 g Tris，溶解于80 mL去离子水中，调节pH8.0，用去离子水定容至100 mL。

2. 供试品溶液

取待测酶液，加测活缓冲液稀释制成每1 μL含0.1单位的溶液。

3. 底物溶液

查看底物标签或质检报告，如浓度为2 mg/mL可按下表测活。如浓度高于2 mg/mL，取底物适量，用测活缓冲液稀释制成2 mg/mL。

4. 测活方法

按下表配制酶切反应液：

配制后分别混匀，5000 rpm离心1 min，恒温于25.0℃ ±0.5℃，酶切12~16 h，取样加入Loading Buffer，煮沸3-5 min制备电泳样品。取电泳样品10 uL进行蛋白电泳。

5. 蛋白电泳结果分析：

电泳结果拍照、分析酶切结果。

6. 酶活定义：1U定义为在25℃，12h~16h之内，将0.5 mg保存于25 mM Tris-HCl 8.0 缓冲液中的融合蛋白切割95%所需的酶量。

3. 储存和运输稳定性

储存稳定性：-20℃及以下，密封，避光，有效期5年。

运输方式：蓝冰保温运输。

4. 注意事项

1. 供试品溶液和底物溶液应现配现用；
2. 应在规定的时间内进行酶切，制备的电泳样品应立即进行电泳和分析。