Bst LF DNA聚合酶
Bst LF DNA Polymerase
Bst LF DNA聚合酶
Cat.No.:ZP05
来源:基因工程生产,大肠杆菌表达
储存温度:-25 ~ -15 ℃保存
有效期:2年
1.产品描述
雅心Bst LF DNA Polymerase由克隆有Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶部分基因的重组大肠杆菌生产,经改造去除了其5'→3'核酸外切酶活性,但具有 5'→3' DNA聚合酶活性以及很强的链置换活性。Bst LF DNA Polymerase可用于等温扩增反应,如LAMP(Loop-mediated isothermal amplification)等。
2.产品组分
组分 |
ZP07-01(800 U) |
ZP07-02(8000 U) |
10×Bst Buffer |
1.0 mL×4 |
|
Bst LF DNA Polymerase(8U/μl) |
100 μl |
1 ml |
Mgso4(100 mM) |
1 ml |
|
3.活性定义
1单位(U)指65℃条件下反应30分钟,使25 nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。
4.注意事项
- ►Bst DNA Polymerase不可用于PCR反应。
- ►Bst DNA Polymerase不具3´→5´核酸外切酶活性。
5.LAMP等温扩增(举例)
(1)配制如下反应混合液
组分 |
体积 |
终浓度 |
ddH2O |
To 25 μl |
|
10×Bst Buffer |
2.5 μl |
1× |
Mgso4(100 mM) |
1.5 μl |
6 mM(total 8 mM) |
dNTP Mix(10 mM each) |
3.5 μl |
1.4 mM |
10×Primers |
2.5 μl |
|
模板DNA |
X |
>10 copies or more |
Bst LF DNA Polymerase(8U/μl) |
0.25 - 1 μl |
0.08 - 0.32 U/μl |
注意:
- 1)防止配制试剂时发生污染
- 2)建议配制反应体系时在冰上进行。
- 3)10×Primers:16 µM FIP/BIP, 2 µM F3/B3, 8 µM Loop F/B each。
- 4)根据实验需要,可加入dUTP/UDG,预防污染。
(2)65 ℃反应30-60 min