BspQI24 重组BspQI限制性内切酶
重组BspQI限制性内切酶
Recombinant BspQI
产品编码：BspQI24
来源：基因工程生产，大肠杆菌表达
储存温度：-20 ± 5℃
有效期：2年
- 产品描述
雅心重组BspQI限制性内切酶来源于球形芽孢杆菌（Bacillus sphaericus），经由基因工程改造，由克隆有该酶编码基因的大肠杆菌生产。BspQI酶属于IIS型限制性内切酶，能识别非回文DNA序列，且切割在识别序列之外，可避免质粒线性化后转录RNA时产生多余的残留碱基，影响mRNA的翻译效率。其酶切位点如下，N为任意核苷酸。
- 产品组分
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产品组分 |
组分编号 |
500 U |
2,500 U |
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BspQI, 500 U |
BspQI24500U-A |
0.05 mL (10,000 U/mL) |
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BspQI, 2,500 U |
BspQI242500U-A |
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0.25 mL (10,000 U/mL) |
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10X Reaction Buffer（2） |
BspQI24-B |
1.25 mL |
1.25 mL |
注：
（1）需要大规格或高浓度可定制。
（2）10X Reaction Buffer成分为：500 mM Tris-HCl, pH 7.9 @ 25℃, 1M NaCl, 100 mM MgCl2, 1 mg/mL rAlbumin
- 活性定义
1单位（U）定义为在体系50 μL的1X Reaction buffer中（50 mM Tris-HCl, pH 7.9 @ 25℃, 100 mM NaCl, 10 mM MgCl2，0.1 mg/mL rAlbumin）, 50℃ 条件下，1小时内酶切1 µg λ DNA所需的酶量。
- 储存缓冲液
BspQI酶的储存缓冲液为10 mM Tris-HCl, pH 7.4 @25℃, 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.2 mg/mL rAlbumin, 50% Glycerol。
- 推荐使用方法
- 以50 μL体系为例，在冰上按照下面表格中的建议依序设置反应体系，首先把5 μL的10X Reaction Buffer和1 μg的DNA（体积 x μL）加纯净水至49 μL，最后再加入1 μL的BspQI, 在50℃下酶切1小时。
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组分 |
用量 |
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10X Reaction Buffer |
5 μL |
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DNA (1 μg) |
x μL |
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H2O |
To 49 μL |
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BspQI |
1 μL |
- 注意事项
- BspQI酶从冰箱拿出后请放置在冰上，使用后请立即放回冰箱（-20 ± 5℃）保存。
- 酶的添加体积不超过反应体积的10% 。
- DNA 底物中应不含乙醇、酚、氯仿、EDTA、变性剂、洗涤剂或高浓度盐，以免影响酶的活性。
- 终止反应：可在80℃加热20分钟终止反应，或者通过DNA吸附柱或苯酚/氯仿纯化终止反应。
- 低盐酶切反应液或在甘油浓度＞5% 酶切条件下，可能出现酶的切割位点专一性发生改变（星号活性）。
- 对 CpG、dcm 或dam 甲基化均不敏感。
