SRLC18 测序级重组赖氨酰内切酶

测序级重组赖氨酰内切酶

Cat.No.：SRLC18

EC：3.4.21.50

别名：重组胞内蛋白酶 Lys-C；重组内切蛋白酶Lys-C

来源：基因工程生产，大肠杆菌表达

储存温度：-15℃或以下，密封，避光储存

1.产品简介

本品为大肠杆菌重组表达赖氨酰内切酶，与天然无色杆菌蛋白酶有相同的酶活性。本品为重组表达产物，不含有其他杂蛋白酶（如 Lys-N、Arg-C等丝氨酸类蛋白酶），特异性针对赖氨酰肽键酶切，包括含DK、PK序列的完全特异酶切。

2.产品特性

（1）产品性状：本品为白色或类白色冻干粉末，装量为0.1，1.0，10.0 mg/支（按酶蛋白含量计）。

（2）酶含量：标示量的±10%（Lowry法，参照2015版中国药典）。

（3）电泳鉴定（SDS-PAGE）：为单一主条带，纯度不低于90%。

（4）电泳鉴定相对分子量为31±3.1 kDa。

（5）RP-HPLC纯度鉴定：面积归一法主峰纯度不低于90%。

（6）酶比活性：不低于3.0AU/mg。

酶活定义：在25 mmol/L pH9.0的Tris-HCl缓冲，温度为37℃的条件下，1min催化生成l μmol AC-Lys-pNA所需的酶量为一个活性单位（AU）。

3.使用方法

溶解缓冲：用无菌水或者 25 mmol/L Tris-HCl，pH 8.0~8.5；溶解后分装，-15℃以下保存。

酶切缓冲：50-100 mmol/L Tris-HCl，pH 8.5~9.5。

推荐条件：蛋白酶:融合蛋白质量比 1:25-1:100（蛋白组学或肽图），1:5000-1:20000（多肽/蛋白生产工艺），37℃反应。针对疏水性强、溶解性较差的蛋白，可添加变性剂或者封闭二硫键（烷基化）使其空间结构被打开，从而提高酶切效率或者提高肽图覆盖率。可以参考以下方法：

（a）添加变性剂：可以添加 30%乙腈、8 mol/L 尿素或 0.1～0.2%SDS 在25 mmol/L Tris-HCl，pH 8.0~8.5。

（b）封闭二硫键：可以添加终浓度为 5 mmol/L 的 DTT在室温反应30 min；再加入终浓度为 10 mmol/L 的碘乙酰胺，在室温避光反应30 min。

4.储存和稳定性

储存稳定性：冻干粉于-15℃以下可以保存至少2年；用纯水溶解后于2-8℃可保存7天，建议用25 mmol/L Tris-HCl (pH8.5)稀释所需浓度后分装，-20℃保存6个月内使用。溶解后应避免反复冻融。

运输稳定性：蓝冰保温运输，活性稳定。

5.产品优势

无动物源性：重组生产，无外源性的病毒污染，生产过程不使用任何动物源原料。

质量稳定：批量生产，可保证稳定连续的批次生产；产品批次间无差异，质量稳定。

符合法规要求：生产设备和生产环境符合相关法规要求，生产过程完全遵循 ISO 9001:2015质量体系并符合GMP指导原则。

质量文件完整：按客户需求，可提供相关法规支持文件。