SAN02 耐高盐核酸酶
产品编码：SAN02
储存条件：-20±5℃，密封
有效期：1年
- 产品用途
耐高盐核酸酶是一种经基因工程改造并在大肠杆菌中表达与纯化的重组非特异性核酸内切酶，与普通全能核酸酶（雅心产品RSN20）相比，在500 mM NaCl盐浓度下仍具高活性，适用于需要高盐处理的生物制品工艺流程中的核酸（DNA和RNA）去除，例如在病毒纯化（例如AAV）、疫苗生产、重组蛋白、多糖类等生物制品工艺中将宿主核酸降低至皮克（pg）级别从而提高生物制品功效和安全性；此外还能有效降低细胞、组织、微生物等裂解液、以及包涵体等样品的粘度，以及有效防止细胞治疗和疫苗研究中，人外周血单核细胞（PBMC）的结团。
- 产品性能指标
|
外观 |
澄清液体 |
|
组分 |
25 mM Tris-HCl, 5 mM MgCl2, 500 mM NaCl, 50% Glycerol, pH 7.5±0.5 |
|
活性 |
≥ 250 U/uL |
|
纯度 |
≥ 95% |
|
辅因子 |
3-10 mM Mg2+ |
|
反应条件 |
pH 7.0-10.0；温度4-50℃；NaCl浓度50-1000 mM |
|
活力单位定义 |
在 37°C、pH 8.5、5 mM MgCl2、500 mM NaCl的反应条件下，30分钟内使△ A260 值变化1.0所需要的酶量为一个活力单位（U）。 |
- 产品优势
（1）耐受高盐环境：为高盐反应条件优化，500 mM NaCl盐浓度条件下仍有高酶活。未糖基化、重组表达、与阳离子交换树脂结合易于去除。
（2）无动物源性：重组生产，无外源性病毒污染，生产过程不使用任何动物源原料。
（3）质量稳定：批量生产，批间差异小，可保证稳定连续的批次供应。
（4）质量体系完善：企业符合ISO9001:2015、 ISO13485:2016质量体系，可提供相关法规支持文件。
- 使用方法
1.样品准备：
a.贴壁细胞：去除培养基，用 PBS清洗后，去除上清；
b.悬浮细胞：离心收集细胞；
c.大肠杆菌或者其他细菌：离心收集细胞；
2.样品处理
将收集到的细胞沉淀按照质量（g）与体积（mL）比 1：(10~20) 的比例进行裂解处理。
3.酶处理
a.调整缓冲液组分并添加MgCl2：将反应体系中的Mg2+浓度调整至5 mM，将pH调整至8.0-9.0；盐浓度可调整至实验所需浓度，酶活性最高的范围是500-600 mM。
b.按照250-500 U消化1 g细胞或菌体悬浮液的比例添加酶（即25-50 U/mL），37℃孵育30 min 以上。也可根据实验需要选择酶量或处理温度，在一定范围内增加酶量，消化时间相应减少。
注意：酶活受离子浓度、反应温度及pH等因素的影响，初次使用时建议摸索最适条件。若溶液偏酸或者偏碱，含有较高浓度的表面活性剂、变性剂，应适当增加酶的用量或延长孵育时间。
4.样品收集
以12,000 rpm 的转速离心30 min收获上清（或其他分离上清的工艺），再进行后续相关实验。
- 储存和运输稳定性
储存稳定性：-20±5℃保存，1年稳定，长期稳定性持续考察中。
运输稳定性：冰袋运输，活性稳定。
注意：本产品不建议-40ºC以下温度条件保存，反复冻融可能会降低酶活性。
