序列分析纯重组胰蛋白酶如何溶解使用,如何储存?

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 1)如何溶解重组胰蛋白酶冻干粉?

   使用50mM HAc 溶解或稀释。

 

2)使用时,溶解液和最适pH缓冲溶液?

   使用时,按照使用终浓度直接稀释在50mM NH4HCO3 或者ph7-8的酶切缓冲溶液中(含有目的酶切蛋白)。

 

3)酶切缓冲液中酶和底物的比例是多少?

   在酶切缓冲液中建议使用1mM CaCl2,重组胰蛋白酶:目的蛋白=1:20-1:100

 

4)酶切时的缓冲液最适pH

   最适pH7.0-8.0的缓冲液,通常用50mM NH4HCO3或者Tris-HCl

 

5)溶解后溶液如何保存?如果反复冻融,稳定性如何?

   溶液储存于-70℃。可反复冻融5次,无降解,无活性损失。

 

 

 

 

  

2019年11月5日 11:17
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