序列分析纯重组糜蛋白酶如何溶解，酶切条件如何？

1）如何溶解糜蛋白酶冻干粉？

使用1mM HCl或50mM HAc溶解，使终浓度为1-10mg/ml。

 

2）酶切时酶和蛋白的比例是多少？

按照质量比，酶量：目的蛋白（质量比）=1:20-1:100，或按照实际实验结果。

 

3）最适温度，pH和缓冲液是什么？

温度为30 °C，pH7.8，40 mM Tris-HCl和5 mM CaCl₂。

 

4）温度过高对酶的影响？

温度超过37℃，酶会自切。